可用检测方法：

大体病理学检查

  • 肺部病变的目视检查
Figure 1. Picture demonstrating the classical cranial ventral consolidation associated with Mycoplasma hyopneumoniae (not diagnostic) and many different bacterial infections as well as some influenza A virus infections. 图 1。图片展示了与以下情况相关的经典颅腹侧实变：猪肺炎支原体（不具诊断性），以及多种不同的细菌感染和某些甲型流感病毒感染。
  • 优点：
    • 易于操作
    • 可评估送往屠宰场的猪是否存在晚期感染
  • 缺点：
    • 不具诊断性／非特征性；还有许多其他可能的原因
    • 需要其他诊断确认

细菌培养

  • 从病变组织或支气管肺泡灌洗液中分离出活的微生物
  • 样本类型：肺组织或支气管肺泡灌洗液
  • 优点：
    • 传统金标准
    • 猪可能在 7-8 个月内检测呈阳性（定植期较长）
  • 缺点：
    • 需要特殊培养基（Friis 培养基）
    • 仅少数实验室可用
    • 价格昂贵
    • 很难培养（假阴性很多）

免疫组织化学（IHC）

  • 检测细菌抗原的存在
  • 样本类型：肺组织
  • 优点：
    • 可在病变部位检测到细菌（是因果关系的有力证据）
    • 猪只可能在 7-8 个月内检测呈阳性（定植时间较长）
  • 缺点：
    • 必须提交正确的组织样本——肺组织必须包含气道横切面（支气管上皮细胞）
    • 需要存在显著更多的细菌
    • 仅评估少量组织样本
Figure 2. Good lung tissue sample for histopathology demonstrating presence of airways (white round circles) on cross section. 图 2。用于组织病理学检查的良好肺组织样本，显示了横截面上的气道（白色圆圈）。

荧光抗体（FA）

  • 检测细菌抗原的存在
  • 样本类型：肺组织
  • 优点：
    • 可在病灶部位检测细菌（是因果关系的有力证据）
    • 猪可能在7-8个月内检测呈阳性（定植期较长）
  • 缺点：
    • 必须提交正确的组织样本——肺组织必须包含气道横截面（支气管上皮细胞）。见上方图2。
    • 需要存在的细菌数量远多于 PCR
    • 仅评估少量组织样本

聚合酶链式反应 (PCR)

  • 检测是否存在特定的细菌核酸序列 (DNA)
  • 样本类型：肺组织、拭子（鼻腔、喉部、气管支气管或支气管拭子），或支气管肺泡灌洗液
  • 优点：
    • 灵敏度非常高（可检测少量细菌）
    • 可对多个样本进行混样，以提高进行猪群诊断时的诊断灵敏度
    • 猪可能在 7-8 个月内检测呈阳性（定植时间较长）
    • 成本适中
  • 缺点：
    • 不能证明患有疾病
    • 口腔液是较差的样本类型（假阴性很多）

表 1：不同样本类型在猪肺炎支原体 PCR 检测中的敏感性研究与现场结果概要：猪肺炎支原体 PCR 检测。

相对敏感性 混样*
口腔液 - 否
鼻拭子 + 可变
喉拭子 ++ 有益
气管-支气管拭子 ++ 有益的
支气管拭子 +++ 有益的
支气管肺泡灌洗 ++ 否
肺组织 ++++ 是

* 混样检测有助于提高诊断敏感性，适用于猪群诊断；不适用于单头猪

酶联免疫吸附试验（ELISA）

  • 检测抗体是否存在
  • 样本类型：血清
  • 优点：
    • 动物可能会长期保持阳性
    • 可用于慢性病例
  • 缺点：
    • 不同市售试剂盒检测到的特异性抗体及其检出时间可能存在显著差异
    • 无法区分母源抗体与接触所致抗体
    • 抗体水平与保护作用不相关
    • 疫苗接种不会诱导血清转换（高度取决于所用的疫苗和检测方法）
    • 许多感染猪不会发生血清转换
    • 在整个感染期间，抗体并非总能被检测到
    • 与其他支原体存在一些交叉反应，尤其是M. flocculare该菌无致病性，且常见于猪体内

结果解读：

大体病理学：

  • 阳性： 肺 大体病理学可用于 可能 诊断
  • 阴性：早期病例通常不会出现广泛的肺部病变

细菌培养：

  • 阳性：确诊疾病
  • 阴性：阴性；如果在感染后过久或抗生素治疗后进行检测，细菌可能会被漏检；或者仅仅是由于其他细菌过度生长而无法培养（细菌存在，但极难培养）

IHC

  • 阳性：病变部位存在细菌
  • 阴性：阴性，或者如果在感染后过久或接受抗生素治疗后才进行检测，可能会漏检细菌

FA

  • 阳性：病变部位存在细菌
  • 阴性：阴性，或者如果在感染后过久或接受抗生素治疗后才进行检测，可能会漏检细菌

PCR

  • 阳性：存在细菌；不能确认患病
  • 阴性：结果为阴性；如果在感染后过晚进行检测或在抗生素治疗后进行检测，可能会漏检细菌

ELISA

  • 阳性：母源抗体，或既往接触过疫苗菌或野生型细菌（通常在接触后 3 至 8 周）
  • 阴性：阴性，或感染未刺激血清转化，或检测时间过早（通常需要在接触后 3 至 8 周）

场景

有慢性咳嗽的育肥猪：

  • 对近期死亡的猪进行尸检，数量为 1-3 头，或对咳嗽的猪实施安乐死。肉眼评估肺部是否存在前腹侧实变。采集多块肺组织（确保样本中包含气道），并置于福尔马林中，以供 IHC 或 FA 评估。
  • 肺部病变所占的百分比与该疾病造成的经济影响直接相关。

确认 Mycoplasma hyopneumoniae 后备动物的阴性替代动物

  • 确保没有咳嗽的临床症状。
  • 从后备动物中随机采集至少 30 份血清样本，并通过 ELISA 进行检测。

在将后备动物引入阳性或阴性繁殖群之前，监测其是否排毒

  • 确保没有咳嗽的临床症状。
  • 从替换动物中随机采集至少 30 份喉部拭子样本。按每组 5 份或 6 份进行混样，并通过 PCR 检测。